EB病毒感染实验室诊断方法与鼻咽癌的关系（简述）

EB病毒是一种重要的感染人类的DNA病毒。EBV是DNA病毒，属疱疹病毒γ亚科，与单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）和Ⅱ型（HSV-2）、巨细胞病毒（CMV）、水痘-带疱疹病毒（VZV）和近年发现的人类第6型疱疹病毒同属人类疱疹病毒组，相互间在形态上难以区分，增殖方式也类似。与EBV感染有关的疾病很多,特别 是与鼻咽癌有密切关系。  在我国，几乎所有四岁以上的人群均已感染过EBV，80%以上的健康成人是EBV携带者。特别在珠江三角洲及香港地区，是世界上NPC的高发区。根据中山 市的NPC统计资料，NPC的年龄性别校正的发病率为18.12/10万(男：25.60 /10万；女：11.05/10万)。97%的NPC为非角化性癌。其中主要是未分化癌, 约占90%; 还有少数是分化型非角化性癌，约占10%。几乎100%的鼻咽非角化性癌均有EBV感染。1997年世界卫生组织的国际抗癌联盟年会上把EBV归类为第一 类致癌物。

随着近代分子生物学的发展，对EBV感染的诊断，从原理到方法都得到了突飞猛进的发展。对病原的测定，由于操作要求高、设备及试剂 昂贵等，应用受到限制，因此EBV感染的免疫血清学检测是目前NPC筛查最常用的手段。NPC的早期诊断与临床分期对放疗的疗效意义重大，病期越早，疗效 越高；病期越晚，疗效越低。

EBV感染B淋巴细胞分为潜伏感染和溶解性感染两种，潜伏感染有三型，各型感染都表达EBNA1抗原，所以选用EBNA1抗原免疫应答产生的各类抗体作为EBV感染的血清学指标最有代表意义。与EBV感染相关的疾病很多。重要的有：传染性单核细胞增多症、NPC和鼻咽以外 (例如肺、腮腺、鼻腔鼻窦、扁桃体、胃等处) 的淋巴上皮瘤样癌、鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤 、淋巴瘤样肉芽肿病、Burkitt 淋巴瘤、一些肠病型T细胞淋巴瘤、一些经典Hodgkin淋巴瘤、一些外周T细胞和B细胞淋巴瘤以及器官移植后的淋巴组织增生症(PTLD)，等等。EBV感染B淋巴细胞分为潜伏感染（latent infection）和溶解性感染（lytic infection）二种。潜伏感染有三型，Ⅰ型潜伏感染表达EBNA1抗原，病征为Burkitt 淋巴瘤(BL)；Ⅱ型潜伏感染主要表达EBNA1抗原和LMP1、LMP2A、LMP2B抗原，病征为NPC和Hodgkin淋巴瘤，研究表明LMP1抗原很可能是诱发肿瘤（Tumour）的主要因素，但由于LMP1在血清中产生的抗体含量低，较难检测，因此不选用它作为血清学指标；Ⅲ型潜伏感染主要表达EBNA1、EBNA2、EBNA3、EBNA4、EBNA5、EBNA6 六种核抗原，病征为PTLD。由此可见，选用EBNA1抗原免疫应答产生的各类抗体作为EBV潜伏感染的血清学指标最有代表意义。

由于鼻咽癌的主要表现是EBV潜伏感染伴有小量的溶解性感染（约15%～20%），溶解性感染出现三个时相，首先表达立即早期抗原（Zebra）；接着表 达早期抗原；最后，淋巴细胞的核膜破裂，合成表达了衣壳抗原（VCA）及膜抗原（MA），这一过程有部分会出现流产，不产生衣壳抗原及膜抗原。释放出来的 EBV合成完整的病毒颗粒后又吸附和侵入B淋巴细胞及其他细胞，在这一转化过程中病毒基因组被扩大。由此可见，传统上选用VCA或MA抗原免疫应答产生的 各类抗体作为EB病毒感染筛查试验指标有一定缺陷，而选用Zcbra抗原免疫应答产生的各类抗体可作为EBV从潜伏期感染到溶解性感染转折点的血清学指标 优于VCA。

NPC的显著特征是病人血清中的EBV抗体（尤其是IgA亚型）水平普遍升高，借此可区分NPC与健康携带者。这种变化在NPC发病前期将先于症状出现，这一血清学特点不仅可用于NPC诊断，而且可作为早期发现癌症的有效手段。

EBV感染的免疫血清学检测是NPC早期诊断的常用手段。其目的有两种，第一，评估患者是否有患鼻咽癌的机会，因为鼻咽癌的症状无特异性，只有少数有症状的患者在后来被发现患有鼻咽癌，血清学检测的阳性结果可以指导随访的进行，并提示继续进行组织病理学检查确诊；第二，血清学检测的阴性结果可用于鼻咽癌排除，提示进行另外的检查方案，以发现患者的其它的病因。此外, EBV血清学体外诊断也常用于高危人群的筛选和风险评估。

由于NPC主要表现是EBV潜伏感染伴少量溶解性感染，传统VCA 和EA免疫荧光法或免疫酶法（选用溶解性感染的表达抗原）针对性不强，而且结果判断欠客观性；研究表明：EBNA 1 IgA ELISA和 zta IgG ELISA联合检测时，比传统方法的VCA-IgA 具有更高的特异性，其综合性能超过VCA-IgA和EA-IgA联合检测时的相应预测值。而新一代的EBV 酶联免疫吸附法试剂盒将EBNA 1 IgA、EBNA 1 IgGELISA和zta IgG ELISA结合在一起联合检测效果更佳，可克服传统方法存在的不足，为NPC的早期发现、早期诊断、早期治疗提供有力的手 段。

注：不同EBV血清学检测方法在NPC的体外诊断中的应用（见下表）。